在之前我們介紹過生物顯微鏡景深的概念，景深的大小是指（前）景深前界到（后）景深后界之間的距離。景深前界是指位于調(diào)焦物點(diǎn)前方，與鏡頭距離zui近的能夠清晰成像的物點(diǎn)所在的垂直平面。景深后界是指位于調(diào)焦物點(diǎn)之后的，與鏡頭距離zui遠(yuǎn)的能夠清晰成像的物點(diǎn)所在的垂直表面。由景深前界到調(diào)焦物點(diǎn)的距離稱為前景深；由調(diào)焦物點(diǎn)到景深后界的距離稱為后景深。
    那么在使用生物顯微鏡時(shí)，如何使拍攝的圖像更加清晰，增強(qiáng)層次感，我們就需要注意在實(shí)際拍攝中影響景深的因素由強(qiáng)到弱可分為以下三種：
    1.在實(shí)際拍攝過程中 ，光圈是對(duì)景深影響zui為明顯的因素。在拍攝距離和鏡頭焦距不變的情況下，光圈越大，景深越小；反之，光圈越小，景深越大。為了有效控制拍攝景深，在攝像機(jī)的濾鏡轉(zhuǎn)盤上專門設(shè)置了灰鏡檔，并按照透光率的不同，分為三個(gè)檔位：1/4、1/16、1/64。在實(shí)際拍攝過程中，有時(shí)為了達(dá)到小景深效果需要使用大光孔，為了彌補(bǔ)開大光孔導(dǎo)致的曝光過度，可以將灰鏡加入光路中以阻擋過多的光量。
    2.焦距在光圈相同且拍攝距離相同的情況下，焦距越大，景深越??；反之，焦距越小，景深越大。而且，當(dāng)鏡頭焦距短到一定程度時(shí)，其產(chǎn)生的影響景深的非常大的。比如魚眼鏡頭的景深就很大。正因?yàn)槿绱耍?dāng)使用超廣角鏡頭進(jìn)行拍攝時(shí)，由于可以有較大的景深，所以在跟拍運(yùn)動(dòng)物體時(shí)可以不必跟焦。
    3.拍攝距離也是一個(gè)很重要的因素，在光圈和焦距不變的情況下，拍攝距離越大，景深越大；反之，拍攝距離越小，景深越小。